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8-27
細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)方法1.凍存細(xì)胞的復(fù)蘇應(yīng)遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調(diào)至37-37。5度，取出凍存的細(xì)胞迅速放入后將細(xì)胞面浸至水面以下不斷搖動(dòng)至融化。在無(wú)菌臺(tái)內(nèi)將*培養(yǎng)基加入50ml的小培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，約5ml左右，然后用無(wú)菌吸管從凍存管內(nèi)取出細(xì)胞，置培養(yǎng)并內(nèi)輕輕搖晃，使細(xì)胞均勻后置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。2.傳代:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃...
7-2
人體細(xì)胞是人體結(jié)構(gòu)和生理功能的基本單位，是生長(zhǎng)、發(fā)育的基礎(chǔ)。人體細(xì)胞形態(tài)多樣,有球形、方形、柱狀形等。其大小差異很大,大多數(shù)細(xì)胞直徑僅有幾個(gè)微米,有的可達(dá)到100微米以上。盡管細(xì)胞的形態(tài)、大小各異,但其結(jié)構(gòu)基本相同。人體細(xì)胞約有40萬(wàn)億—60萬(wàn)億個(gè)，細(xì)胞的平均直徑在5—200微米之間。除成熟的紅血球和血小板外，所有細(xì)胞都至少有一個(gè)細(xì)胞核，是調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動(dòng)、控制分裂、分化，遺傳，變異的控制中心。人體由體細(xì)胞和生殖細(xì)胞組成：人體細(xì)胞初由1個(gè)成熟受精卵細(xì)胞開始,分裂為2個(gè)細(xì)胞,繼...
6-30
建議在無(wú)菌條件下采用下列方法進(jìn)行恢復(fù)培養(yǎng)。方法一:1、用浸過75%酒精的脫脂棉團(tuán)擦凈安瓿表面。2、待安瓿表面酒精揮發(fā)后，將安瓿的封口端移至酒精燈火焰上加熱。3、用無(wú)菌水滴至加熱的安瓿頂端使玻璃破裂。4、用無(wú)菌鑷子敲開安瓿頂端。5、用無(wú)菌吸管加入0、3～0、5ml的液體培養(yǎng)基于安瓿管內(nèi)，使凍干菌種溶解呈懸浮液。6、混勻后，將懸浮液移植于液體培養(yǎng)基中或固體瓊脂上，在適宜溫度等條件下培養(yǎng)。方法二:1、用三棱鋼銼在封口下約2cm處橫銼安瓿。2、用浸過75%酒精的脫脂棉團(tuán)擦凈安瓿表面。...
6-28
1冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。2細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí)，是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO敏感之細(xì)胞外，絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞)，在解凍之后，應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附...
6-15
標(biāo)準(zhǔn)菌株是屬于種屬鑒定的規(guī)范參照菌，而質(zhì)控菌株，往往是從功能或用途上講的，通常是以標(biāo)準(zhǔn)菌株用來做質(zhì)控的。標(biāo)準(zhǔn)菌株使用注意事項(xiàng)：1、選擇合適的培養(yǎng)基：勿使用選擇性培養(yǎng)基。一般使用非選擇性的增菌培養(yǎng)基，因?yàn)槲⑸镌谶x擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)某些生物特性可能丟失，保藏的菌種的生物特性可能與標(biāo)準(zhǔn)菌株特性不同。2、菌液的濃度：菌液的濃度一般越大，菌種保存時(shí)間越長(zhǎng)。保藏時(shí)細(xì)菌常使用菌液，霉菌常用無(wú)菌水或生理鹽水制備成的孢子懸液。3、甘油濃度：甘油終濃度一般為10%~20%。由于甘油原液太粘稠，需...
6-15
菌種是從事微生物學(xué)及生命科學(xué)研究的基本材料，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，診斷制品的制備，菌苗的生產(chǎn)、微生物致病性研究。1、梭氏法將容有1滴細(xì)胞懸液的小管﹐置于盛有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大試管中﹐用真空泵抽至1、3帕?xí)r﹐將大試管密封保存。這是為減少細(xì)胞死亡率而采取的一種不經(jīng)凍結(jié)﹑緩慢脫水的干燥保藏法﹐適用于多種細(xì)菌﹑真菌。2、冷凍真空干燥法將細(xì)胞懸液每0、1~0、2毫升注入一無(wú)菌安瓿瓶﹐于-40℃預(yù)凍1小時(shí)﹐再于-20~30℃﹑真空度為13、3帕的條件下脫水。在脫水過程后期﹐安瓿瓶外溫...
4-20
所有體外培養(yǎng)細(xì)胞，包括初代培養(yǎng)及各種細(xì)胞系，當(dāng)生長(zhǎng)達(dá)到一定密度后，都需做傳代處理。傳代的頻率或間隔與培養(yǎng)液的性質(zhì)、接種細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞增殖速度等有關(guān)。接種細(xì)胞數(shù)量大、細(xì)胞基數(shù)大、相同增殖速度條件下，細(xì)胞數(shù)量增加與飽和速度相對(duì)要快（實(shí)際上細(xì)胞接種數(shù)量大時(shí)細(xì)胞增殖速度比稀少時(shí)要快）。連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞系比初代培養(yǎng)細(xì)胞增殖快，培養(yǎng)液中血清含量多時(shí)細(xì)胞增殖比少時(shí)快。以上情況都會(huì)縮短傳代時(shí)間。所謂細(xì)胞“一代”一詞，系僅指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)時(shí)的一段時(shí)間，這已成為培養(yǎng)工作中的一種習(xí)慣說...
4-11
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別，列表說明我來答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：一、概念不同1、細(xì)胞株：細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株（CellStrain）。2、細(xì)胞系：細(xì)胞系（cellline）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。二、形成方法不同1、細(xì)胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細(xì)胞株。...
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